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美国维康(vicam)免疫亲和柱净化荧光光度法

2018-09-27      88
美国维康(vicam)免疫亲和柱分析原理:
美国维康(vicam)免疫亲和柱试用大剂量的黄qu霉du素的单克隆抗体固化在水不溶性的载体上,然后装柱而成。试样中AF用一定比例的甲醇/水提取,提取液经过过滤稀释后,用美国维康(vicam)免疫亲和柱净化,以甲醇将亲和柱上的黄qu霉du素林洗下来,在淋洗液中加入溴溶液衍生,以提高测定灵敏度,然后用荧光分光光度计进行定量。也可以将甲醇-黄qu霉du素淋洗液的一部分加入HPLC中,对黄qu霉du素B1B2G1G2分别进行定量分析。
 
美国维康(vicam)免疫亲和柱净化荧光光度法
美国维康(vicam)免疫亲和柱净化结合荧光光度法检测黄qu霉毒素的新方法,此法利用抗原抗体——对应的特异吸附特性,以黄qu霉毒素单克隆抗体为填充柱,特异性、选择性地吸附黄qu霉毒素,再以甲醇为流动相将结合的黄qu霉毒素洗脱下来然后通过溴溶液衍生,所得衍生物可发射荧光,再通过荧光光度计分析即可以测定毒素含量。
 
此方法克服了TLC法和HPLC法在操作过程中使用剧毒的真菌毒素作为标定标准物和在样品预处理过程中使用多种有毒、有异味的有机溶剂对操作人员造成身体伤害和污染环境的缺点,所需仪器设备轻便易携带,自动化程度高,操作简单,灵敏度可达1μg/kg,回收率在85%以上。
 
一个样品只需10~15 min便能直接读出测试结果,比传统方法快几个小时甚至几天时间。
缺点是此法只能测定黄qu霉毒素的总量且对试剂要求比较高,检测中药材黄qu霉毒素的含量时结果会出现一些假阳性。
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